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化学名 ：Cyanine 5-NHS
CAS 号 ：1263093-76-0 。
分子式 ：C36H42ClN3O4 。
分子量 ：615.29 至 667.54 。
外观 ：暗蓝色粉末 。
纯度 ：一般在 95% 以上。
激发波长 ：约 649nm 。
发射波长 ：约 665nm 。
溶解性 ：易溶于有机溶剂如 DMSO、DMF、二氯甲烷、甲醇等，难溶于水 。
结构与功能
Cy5 荧光团 ：Cy5 是一种近红外荧光染料，具有高荧光强度、稳定性和优良的光学性质，其激发波长约为 650nm，发射波长为 670nm，适合多色荧光成像。
NHS 酯基团 ：NHS 酯是一种常用于活性酯化学反应的基团，能够迅速与氨基反应，形成稳定的酰胺键，从而实现与生物分子的共价偶联。
应用领域
生物成像 ：可用于细胞和组织的荧光成像，通过标记生物分子，观察其在细胞或组织中的分布和功能，也可用于小动物活体成像。其近红外荧光避开了可见光区，使激发的荧光受生物组织本底的影响较少，能够在深层组织产生信号。
免疫荧光染色 ：可以与抗体结合，用于免疫细胞染色和蛋白质定位实验，如在免疫组化分析中标记特定抗体，检测细胞中的目标蛋白质。
基因表达分析 ：可用于标记 DNA 或 RNA 探针，进行基因表达分析和原位杂交实验，如标记特定基因的探针，检测该基因在组织或细胞中的表达情况。
细胞示踪 ：可用于细胞跟踪实验，研究细胞迁移、增殖和分化等过程，如标记细胞膜，追踪细胞在体内或培养皿中的运动轨迹。
药物传递研究 ：可用于研究药物的传递和释放过程，如标记纳米粒子或载药系统，追踪药物在体内的分布和释放动力学。
分子探针开发 ：可与其他荧光染料结合，用于高通量筛选和分析。
生物传感器构建 ：可用于检测生物分子和分析样品中的特定成分。
使用方法
准备染料溶液 ：根据实验需求，将 Cyanine 5-NHS 溶解于适当的溶剂中，如 DMSO、DMF 等，配制成一定浓度的储备液。
标记生物分子 ：将待标记的生物分子与 Cyanine 5-NHS 溶液混合，在适当的条件下孵育，使 Cyanine 5-NHS 与生物分子上的氨基发生反应，形成稳定的酰胺键。
去除未反应的染料 ：反应结束后，可通过透析、离心、过滤等方法去除未反应的 Cyanine 5-NHS 和杂质。
后续处理 ：根据实验目的，对标记后的生物分子进行后续处理和分析，如荧光成像、流式细胞术等。
注意事项
避光保存 ：Cyanine 5-NHS 对光敏感，应避光保存，可分装后于 - 20℃或 - 80℃保存。
控制反应条件 ：标记反应的 pH 值、温度、时间等条件对标记效果有影响，一般反应 pH 为 7.0-9.0，温度为 0-37℃，时间根据实验而定。
优化反应体系 ：在反应体系中，应避免存在与 NHS 酯基团反应的物质，如伯胺等，以免影响标记效果。
纯化标记产物 ：标记后应充分纯化生物分子，去除未反应的染料和杂质，以保证实验结果的准确性。
